T/TFHT C017-2019 红花产品标准

3　术语和定义
3.1　红花
本品为不带子房的管状花，长 1?2cm。表面红黄色或红色。花冠 筒细 长，先 端 5 裂 ，裂片 呈狭条形 ，长5?8mm;雄蕊5，花药聚合成筒状，黄白色；柱头长圆柱形，顶端微分叉。质柔软。气微番，味微苦
4　技术要求
4.1　质量要求
应符合表1的规定。
表1　红花质量指标
项目　指标
杂质　≤2%
水分　≤13.0％
总灰分　≤15.0％
酸不溶性灰　≤5.0%
红色素（吸光度）　≥0.2
浸出物　≥30.0%
羟基红花簧色素A　≥1.0%
山柰素　≥0.050%
感官要求　本品为不带子房的管状花，长 1?2cm。表面红黄色或红色。花冠?筒细?长，先?端 5 裂?，裂片?呈狭条形?，长5?8mm;雄蕊5，花药聚合成筒状，黄白色；柱头长圆柱形，顶端微分叉。质柔软。气微番，味微苦。
酸性红73、金橙II、柠檬黄、胭脂红、 偶氮玉红、日落黄　不得检出
5　检验方法
5.1　杂质
1.取适量的供试品，摊开，用肉眼或借助放大镜(5?10倍）观察，将杂质拣出；如其中有可以筛分的杂质，则通过适当的筛，将杂质分出 。
2.将各类杂质分别称重，计算其在供试品中的含量（％)。
5.2　水分
测定法取供试品2?5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm，疏松供试品不超过 10mm, 精密称定，开启瓶盖在100?105°C干燥5小时，将瓶盖盖好 ，移置干燥器中，放冷30分钟，精密 称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（％)。
5.3　总灰分
测定用的供试品须粉碎吗，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品2?3g，置炽灼至恒重的坩埚中 ，称定重量（准确至O .Olg ),缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500?600℃,使完全灰化并至恒重 。
根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（％ )。
如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或10%硝酸铵溶液2mL,使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化
5.4　酸不溶性灰
取5.3所得的灰分，在坩埚中小心加入稀盐酸约10mL，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5mL冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（％)。
5.5　红色素
取本品，置硅胶干燥器中干燥24小时研成细粉，取约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，加80%丙酮溶液50ml，连接冷凝器，置50℃水浴上温浸90分钟放冷，用3号垂熔玻璃漏斗滤过，收集滤液于100mL量瓶中，用80%丙酮溶液25ml分次洗涤，洗液并人量瓶中，加80%丙酮溶液至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在518nm的波长处测定吸光度。
5.6　浸出物
取供试品约4g，精密称定，置250?300mL的锥形瓶中，精密加水100mL，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃：干燥 3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸，出物的含量（％ )。用稀乙醇作溶剂。
5.7　含量测定
羟基红花簧色素A
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液（26 : 2 : 72)为流动相，检测波长为403nm，理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000
对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每1mL含0.13mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约 0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人25%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率300W，频率5kHz)40分钟，放冷，再称定重量用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶各10μL,注如液相色谱仪，测定，即得。
最终结果按干燥品计算。
山柰素
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇：0.4%磷酸溶液（52 : 48)为流动相；检测波长为367nm。理论板数按山柰素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：取山柰素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含9μL的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约 0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加如甲醇25mL称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过 ，精密量取续滤液15ml，置平底烧瓶中，加盐酸溶液（15→37)5ml,摇匀，置水浴中加热水解30分钟，立即冷却转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过 ，取续滤液 ，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。最终结果按干燥品计算。
酸性红73、金橙II、柠檬黄、胭脂红
（1）取本品2g,剪碎，加70%乙醇20ml,超声处理20分钟，离心,取上清液作为供试品溶液。另取酸性红73、金橙II、柠檬黄和胭脂红对照试剂适量，加70%乙醇制成每lmL含0.1 mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液10 UL对照试剂溶液5UL分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿：甲醉：冰乙酸（7： 1： 2）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。供试品色谱中，在勻金橙II对照试剂色谱斑点相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。上述薄层板再以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1： 3： 3： 1： 1）为展开剂，展开，收出，晾干，在可见光下检视。供试品色谱中，在与酸性红73、柠檬黄和胭脂红对照试剂色谱斑点相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。若出现相同颜色的斑点，或相同位置有干扰不能判断时，则用高效液相色谱法验证。
（2）照高效液和色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙睛为流动相A, 0.05moL/L醋酸铵溶液为流动相B；按下表进行梯度洗脱：
时间（min）　流动相A （%）　流动相B （%）
0→30　5→45　95→55
A: 432nm波长检测柠檬黄：在485nm波长检测金橙II ；在509nm波长检测酸性红73、胭脂红。理论板数按金橙II峰计算，应不低于3000。
对照试剂溶液的制备：取酸性红73、金橙II、柠檬黄和胭脂红对照试剂适量，加70%乙醇制成每lml约含25 ug的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取上述［检査］（1）项下的供试品溶液，即得。
测定法 取供试品溶液相对照试剂溶液各10μL,注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
备注；
1、　必要时可采用高效液相色谱?质谱联用方法验证。建议采用乙腈0.02moL/L醋酸铵流动相系统。质谱检测参数：装配有电喷雾离子源：扫描方式：金橙II，ESI-打描；酸性红73, ESH+与ESI-同时扫描；柠棣黄、胭脂红ESl+扫描。同时进行一级质谱全扫描、二级质谱仝扫描，扫描范围:100-600m/z
2、因柠檬黄保留较弱，建议采用250mm长度规格的液相色谱柱。
偶氮玉红日落黄
取本品2g,加70%乙醇20mL，振摇10分钟，滤过，滤液挥至月2mL,作为供试品溶液。另取偶氮玉红、日落黄对照试剂适量，加70%乙醇制成每lmL各含0.05mg的溶液，作为对照试剂溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）测定。吸取上述供试品溶液及对照试剂溶液各10μL分别点于同一硅胶G薄层板上，乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（2：2：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾十。供试品色谱中.在与日落黄、偶氮玉红对照试剂色谱斑点相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。若出现相同颜色的斑点，或相同位置有干扰不能判断时.则采用下列高效液相色谱法验证。
照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷铤合硅胶为填允剂：以乙睛为流动A,0.05mol/L醋酸铵溶液为流动相B，按的规泄进行梯度洗脱；在波长484nm处检测日落黄：在波长518nm处检测偶氮玉红、理论板数按日落黄对照试剂峰计算，应不低于3000。
时间（min）　流动相A%　流动相B%
0→30　5→45　95→55
对照试剂溶液的制备：取偶氮玉红、日落黄对照试剂适量，加初始比例流动相制成每lmL各含25μg的溶液，作为对照试剂溶液。
供试品溶液制备：取本品2g加初始比例流动相30mL,超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
测定法：取供试品溶液和对照试剂溶液各10μL注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。偶氮玉红对照试剂在518±2nm处显示最大吸收；日落黄对照试剂在484±2nm处显示最大吸收。
备注：必要时可采用高效液相色谱—质谱联用法验证。
6　检验规则
6.1　检验组批和抽样
取样法是指选取供检定用药材样品的方法。取样的代表性直接影响到检定结果的正确性。因此,必须重视取样的各个环节。
取样前,应注意品名、产地、规格等级及包件式样是否一致，检查包装的完整性、清洁程度及有无水迹、霉变或者其他污染情况，详细记录。凡有异常情况的包件，应单独检验。
同一班次或同批原料生产的同一品种，为一个检验批，从每批产品不同部位随机抽取6袋，分别做感官、理化指标、卫生指标检验，留样。
6.2　出厂检验
出厂检验包括感官各项指标。
6.3　型式检验
型式检验项目为5.1－5.4条款中的所有项日指标,正常情况下每批,有下列情况之一者,应进行型式检验：
a)工艺或原材料发生重大改变时;
b)产品投产鉴定前；
c)产品停产6个月以上再生产时；
d)国家质量监督部门检验,检疫行政主管部门提出要求时。
6.4　判定原则
检验结果全部项目符合本标准规定时,判该批产品为合格品。
7　包装、贮存、运输、保质期
7.1　包装
包装材料应清洁、干燥、无毒、无异味,符合相应的包装标签和说明书管理规定和相应的国家卫生要求。
7.2　贮存
置通风干燥处，防蛀。
7.3　运输
运输工具应清洁、干燥、无异味、有篷盖。运输中应轻装、轻卸、防雨、防晒。
7.4　保质期
在规定的贮存运输条件下，以复验的形式确定产品有效期。